动物行为学实验种类繁多，分为学习记忆类、抗焦虑抑郁类、抗疲劳类、神经精神类、痛觉测试类等，研究不同的疾病模型时，研究人员需根据关注的具体行为选择合适的研究手段。前两期（详情请点击小鼠行为学实验（中）：小鼠到底在想什么呀？及小鼠行为学实验（上））我们分析了动物行为学七个实验，以此科学客观地评价其沟通、社交、学习和探索能力等。本期小鼠行为学实验（下）让我们继续盘点小鼠行为学经典实验。

(八)强迫游泳实验

⏩强迫游泳实验（Forced swimming test）原理主要是让小鼠被迫在一个局限且无法逃脱的空间游泳，由于啮齿类动物先天对水厌恶，它们在水中会拼命挣扎游动，并试图逃离水环境，一段时间后，发现逃离无望时动物停止挣扎表现出“行为绝望”状态（漂浮不动状态）。小鼠强迫游泳实验以游泳的不动时间为主要指标检测动物的绝望行为，是抗抑郁药物初筛以及检测模型动物是否出现抑郁行为的常用检测实验。强迫游泳的测试缸为透明圆柱形（直径15cm，高30cm），测试之前，向缸内加入高15cm的水，水温保持在23-25℃，将实验小鼠放入测试缸内，视频记录6min，记录后面4min小鼠不动的时间。

(九)悬尾实验

⏩悬尾实验（Tail suspension test）是一种经典而又能快速评价抗抑郁药物、兴奋药物、镇静药物药效的方法。其原理是利用小鼠悬尾后企图逃脱但又无法逃脱，从而放弃挣扎，进入特有的抑郁不动状态，实验过程中记录动物不动时间来反映抑郁状态，抗抑郁药物、兴奋药物能明显地缩短改变其状态。将小鼠悬吊在离工作台20-25cm的地方，用胶带将小鼠的尾部分后1/3固定在支架上，小鼠只有在被动地完全静止的情况下才被认为是不动的，在6min的时间内，静止时间由一个对研究背景不了解的实验人员记录。

(十)水迷宫实验

⏩水迷宫实验（Morris water maze）是一种利用动物厌水天性，迫使动物寻找水中隐藏可站立平台的实验。并通过对小鼠寻找平台所花费的时间进行统计分析，判断动物对于空间位置和方向的记忆能力。在圆形水池（直径120cm ）中放置一个逃生平台（直径10cm ）。水池注入水并用染料将水进行染色，水温保持在 23±1℃，水迷宫东西南北方向自定义，一般定义为S在实验者方向，N在实验者相反的方向，E在右边，W在左边，这样迷宫就分为4个象限，平台位于其中一个象限的中间。实验的平台可放在一个象限中进行所有的实验，或者平台在每一个象限中测试1/4的动物，后一种方法抵消了可能的象限效应。一名实验人员可以使用8种不同的平台位置。无论选择哪个象限，平台通常位于中心和墙壁的中间位置，尽管有时也会使用其他安排。为了防止形成起始位置与目标平台的产生长短距离，一般起始位置的选择不应选择平台所在的象限起始位置，例如目标是SE，起始位置可选N、W、NE、SW。

获得性训练：将小鼠头朝池壁放入水中，放入位置随机取东（E）、西（W）、南（S）、北（N）四个起始位置之一。记录动物找到水下平台的时间。在前几次训练中，如果这个时间超过60s，则引导动物到平台或直接将动物放在平台上，让动物在平台上停留15s。每只动物每天训练4次，实验之间的间隔10-15s到5-15min都可以，训练5天（如table 1，获得性训练的平台在SW，逆转训练的平台在NE），连续训练至小鼠找到平台的时间低于15s。

探查训练：最后一次获得性训练结束后的第二天，将平台撤除，开始60s的探查训练。将动物由原先平台象限的对侧放入水中。记录动物在目标象限（原先放置平台的象限）所花的时间和进入该象限的次数，以此作为空间记忆的检测指标。

逆转训练：测定动物的工作记忆（working memory）。探查训练结束后的第二天，开始逆转训练。将平台放在原先平台所在象限的相反象限，方法与获得性训练相同。每天训练4次。每次记录找到平台的时间和游泳距离以及游泳速度。

逆转探查训练：最后一次逆转训练的第二天进行，方法与上述探查训练类似；记录动物60s内动物在目标象限（平台第二次所在区）所花时间和进入该区的次数。学习和记忆能力评估：记录测试小鼠在每个象限中花费的时间百分比、在训练过的平台位置上经过的次数、在未训练的象限中的相应区域中花费的时间和游泳速度。通过记录测试小鼠在每个象限中花费的时间、在训练的平台位置上的经过次数和在未训练的象限中的类似位置所花费的时间进行比较来评估探索试验中测试小鼠的学习和记忆能力。

(十一）前脉冲抑制实验

⏩前脉冲抑制实验（Prepulse Inhibition，PPI）是一种感觉运动门控的测量方法，中枢神经系统天然具有过滤和筛选信息的能力，以保证思维的连贯性，这个机制称为感觉运动门控。精神分裂症具有感觉运动门控失调或前脉冲抑制缺失的现象，PPI被认为是建立精神分裂症动物模型一个重要的基础。PPI是指在一个较强的惊跳刺激之前约30-500毫秒（ms）预先给予一个较弱的刺激可以抑制对惊跳刺激的反应程度。本研究中PPI的检测使用SR-LAB惊跳反射检测系统（San Diego Instruments，San Diego, CA）。PPI实验共42个测试（trials）：包括6个惊跳测试（Pulse-alone，120dB），前脉冲刺激和惊跳强刺激联合测试（Prepulse+Pulse，74-120dB，78-120dB， 82-120dB，86-120dB， 90-120dB）各6个，6个无刺激测试（70dB）。在实验之前，将每只小鼠在背景白噪声（背景噪声70 dB，此强度下的噪声可以较好地掩盖实验室环境噪声）下适应有机玻璃圆柱体5min。随后是42个测试以随机顺序出现，平均间隔为15s。测试共有7种类型：测试1（120dB），持续40ms；测试2-6（5种前脉冲强度分别为74dB，78dB， 82dB，86dB,，90dB，前脉冲持续20ms，然后是100ms的间隔，再出现120dB惊跳强刺激，持续时间40ms）；测试7，70 dB背景噪声；7类测试均出现6次。记录惊吓反应65ms，从惊吓刺激开始每隔1ms测量一次。在65ms采样窗口内记录的最大惊吓幅度（mV_Max）作因变量。由每个前预脉冲强度引起的PPI的百分比（PPI%）计算为[1-（平均Prepulse+Pulse的反应幅度）/（平均Pulse-alone的反应幅度）]×100％。

总结 

灵赋尊龙凯时生物拥有大小鼠行为学平台，提供充分的动物实验空间，专业行为学实验设备及记录分析系统，可提供水迷宫、新物体识别、Y迷宫、转棒、旷场、强迫游泳、高架十字迷宫等全套测试设备。平台有专业博士指导，欢迎广大客户致电咨询：0755-86325431，我们竭诚为您服务。